Ames Mutajenite testi, bir tıbbi cihaz/malzemeden elde edilen bir özütün potansiyel mutajenik aktivitesini belirlemek için kullanılır. Bakteriyel Ters Mutasyon Testi (Ames testi), bir tıbbi cihazdan/materyalden gelen sızıntıların mutajenik olup olmadığını belirlemek için genotoksisite testleri dizisinin bir parçası olarak gerçekleştirilir.
Bu test, genotoksisite için in vitro testlerin üç seviyesinden biri olarak OECD ve ISO yönergelerine uygundur ve AAMI/ANSI/ISO/10993-3, AAMI/ANSI/ISO/10993-1, AAMI/ANSI/ISO/ 10993-12 ve OECD 471 standartları ile uygulanır.
Uygulanabilir Standartlar
- AAMI / ANSI / ISO 10993-3
- OECD 471
- ASTM E1687
- ANSI / AAMI / ISO 10993-12
Örnek Özellikler
- GTX110: 4 eksiksiz cihaz, her biri >60 cm2 veya 2 gram
- GTX150: 10 mL
Çalışma Anahattı
Ames Mutajenite testi, mutasyona duyarlılıklarına göre seçilmiş birkaç Salmonella typhimurium suşu kullanır, çünkü:
- Bakteri yüzeyini kaplayan lipopolisakkarit bariyerinin kısmi kaybına neden olan ve büyük moleküllere karşı artan geçirgenlikle sonuçlanan bir mutasyona bağlı olarak artan hücre duvarı geçirgenliği (rfa mutasyonu)
- Bakteri hücre sisteminde DNA'daki kusurları kesip onaran, hasar görmüş veya mutasyona uğramış bölümlerin onarılamamasıyla sonuçlanan bir mutasyon (uvrB mutasyonu)
- Hataya açık DNA onarım sistemleri içeren R faktörlü plazmitler (bazı suşlar) ve çok kopyalı bir plazmit (bazı suşlar)
Test edici suşlar ayrıca, histidin üretimini kontrol eden gendeki bir mutasyon nedeniyle büyüme için histidine ihtiyaç duyarlar.
Testler, sadece küçük miktarlarda histidin içeren yumuşak bir agar solüsyonunda test organizması ile test maddesinin bir ekstraktının karıştırılmasıyla gerçekleştirilir. Histidin, aşılanmış test organizmasının sınırlı sayıda bölünme geçirmesine izin verir, ancak normal büyümeye izin vermek için yetersizdir.
Bununla birlikte, suş bir ters mutasyona uğrarsa (spontan veya test maddesi veya pozitif kontrol materyali tarafından indüklenmiş), organizma artık büyümek için histidine ihtiyaç duymaz ve görünür bir koloni veya revertant üretebilir. Yalnızca histidin geni bölgesindeki test organizmasında meydana gelen mutasyonlar, test organizmasının bir organizmaya ters mutasyon geçirmesine neden olur, bu da artık histidine ihtiyaç duymaz.
Test edici suşlar, çeşitli mutajen türlerini tespit etmek için seçilir. Kullanılan test edici suşlar TA97A, TA98, TA100, TA102 ve TA1535'tir.
Test maddesinin özlerinin, az miktarda histidin ile test organizmasını içeren bir plaka üzerinde lekelendiği bir nokta testi de gerçekleştirilir. Test maddesi agardan yayıldıkça daha seyreltik hale gelir. Bu, test edici suşların bir miktar inhibisyonuna neden olan mutajenlerin saptanmasına izin verir.
Testler hem S-9 aktivasyonlu hem de onsuz gerçekleştirilir. S-9 aktivasyon sistemi, memeli karaciğer enzim sistemlerini simüle etmek için tasarlanmıştır ve mutajenik olmayan formlardan metabolik aktivasyona uğrayan maddeleri tespit etmek için kullanılır.
Ames Mutajenite Testi söz konusu olduğunda Science by EUROLAB, 25 yılı aşkın endüstriyel laboratuvar tecrübesi, uzman ekibi ve son teknoloji araçları ile sizlere en iyi hizmeti sunmayı taahhüt eder.
