Sitotoksisite testi, tıbbi cihaz ve malzemelerin genel toksisitesini değerlendirmek için tasarlanmıştır. Test, cihazların bir hücre kültürü ortamında çıkarılmasını ve ardından özüt sıvısının fare fibroblast hücrelerine (L929) maruz bırakılmasını içerir.
Hücreler, kalitatif veya kantitatif yöntemler kullanılarak değerlendirilmeden önce, belirli bir süre ekstrakt sıvısında büyümeye bırakılır. Test, hasta teması olan tüm tıbbi cihazlarda, ham maddelerde ve temizlik validasyonundan veya artık üretimden geçen cihazlarda gerçekleştirilir.
Uygulanabilir Standartlar
- ANSI/AAMI/ISO 10993-5
- ANSI/AAMI/ISO 10993-12
Örnek Özellikler
- CTX101 : 400 mm2 veya 2 gram; 3 parçaya bölünmelidir > 100 mm veya 100 mg
- CTX110 : 1 komple cihaz, her cihaz 30 cm2 veya 4 gram olmalıdır
- CTX112 : Numune Miktarı: 30 cm² veya 4 gram.
- CTX115 : 1 komple cihaz, her cihaz 30 cm2 veya 4 gram olmalıdır
- CTX116 : Yüzey alanı = 30 cm2 olan eksiksiz bir cihaz. Minimum yüzey alanı gereksinimini sağlamak için birden fazla cihaz bir araya toplanabilir.
- CTX117 : Yüzey alanı = 30 cm2 olan eksiksiz bir cihaz. Minimum yüzey alanı gereksinimini sağlamak için birden fazla cihaz bir araya toplanabilir.
- CTX125 : 1 komple cihaz, her cihaz 30 cm2 veya 4 gram olmalıdır
Sitotoksisite/MEM/Agar Kaplama için Çalışma Anahattı
MEM Elüsyon
Cihazları/materyalleri genellikle serum destekli memeli hücre kültürü ortamında (MEM) 37 ± 1ºC'de ekstrakte edilir. Ekstraksiyondan sonra, ekstraktlar, L-929 hücrelerinin (fare fibroblastları) bir tek tabakası ile temas halinde yerleştirilir. Daha sonra hücreler, kalitatif veya kantitatif yöntemler kullanılarak değerlendirilmeden önce, belirli bir süre ekstraksiyon sıvısında büyümeye bırakılır.
Nitel
Kalitatif değerlendirme, hücrelerin mikroskop altında gözlenmesini ve sitotoksik bir derece (0-4) atamasını içerir. Derece, tahmini bir liziz (ölüm) yüzdesine ve hücrelerin morfolojisine (görünümüne) dayanır. Test materyalleri, sitotoksik skor ≤ 2 (≤ %50 lizis) ise testi geçer.
Nicel
Kantitatif değerlendirme, hücrelerin metabolik aktivitesini değerlendirmek için kullanılan bir tetrazolyum boyası kullanır. Sonuçlar, canlılık yüzdesi (canlı hücre yüzdesi) olarak rapor edilir. Test materyalleri, eğer yüzde canlılık ≥ %70 ise testi geçer. Test eşyası özütünün çoklu dilüsyonları genellikle her deneye dahil edilir.
Agar Kaplama
Malzemeleri genellikle kuyu başına en az 100 mm2 malzeme kullanılarak yüzey alanı ile test edilir. Ağırlık, kuyu başına en az 100 mg kullanılarak sıvılar, jeller veya tozlar için de kullanılabilir. Materyal, L-929 hücrelerinin bir tek tabakasının üzerine yerleştirilmiş bir agaroz tabakasına yerleştirilir ve 24-26 saat 37 ± 1ºC'de %5 ± %1 CO2 içinde inkübe edilir. İnkübasyondan sonra, hücre yıkım bölgesi ölçülür ve AAMI/ANSI/ISO 10993-5'te listelenen 0 – 4 ölçeğine göre puanlanır. Malzeme, sitotoksik yanıt derece 2'den (hafif reaktif) büyük değilse ISO gerekliliklerini karşılar. Agar Overlay, tarihsel olarak kabul edilen bir test yöntemi olmasına rağmen, belirli düzenleyici kurumlara gönderilirken uygun olmayabilir.
Sitotoksisite Başarısızlıkları
Bazen bir cihaz veya malzeme, ANSI/AAMI/ISO 10993-5 standardının izin verdiğinden daha yüksek bir sitotoksik reaktivite düzeyi sergileyecek ve başarısız bir testle sonuçlanacaktır. Ürününüz sitotoksisite testini geçememiş olsa da, bu mutlaka cihazınızın veya materyalinizin klinik kullanım için güvenli olmadığı anlamına gelmez. Bu basitçe, başarısızlığın kaynağını belirlemeniz ve herhangi bir toksikolojik riski değerlendirmeniz gerektiği anlamına gelir.
Uzmanlarımız Yardımcı Olabilir
Sitotoksisite başarısızlığının birkaç olası nedeni vardır ve Science by EUROLAB, arızayı belirlemenize ve değerlendirmenize yardımcı olacak hizmetler sunar. Oradan uzmanlarımız, hasta güvenliğine yönelik herhangi bir potansiyel toksikolojik riski değerlendirebilir.
Cihazla ilgili materyalleri ve süreçleri değerlendiriyoruz. Bu bilgilere dayanarak, uzmanlarımız genellikle başarısızlığın nedenini belirlemek için hedeflenen analitik kimyayı önerecektir. Ardından, test ve değerlendirme yoluyla başarısızlığı haklı çıkarmak için müşterilerle birlikte çalışabiliriz.
Sitotoksisite başarısızlığının nedenini belirlemek ve bir eylem planı geliştirmek için uzmanlarımızla yapılacak bir tartışma, genellikle üreticilerin başka bir işlem yapmadan cihazlarını düzenleyici onay için başarıyla göndermesine yol açar.
Sitotoksisite Testi söz konusu olduğunda Science by EUROLAB, 25 yılı aşkın endüstriyel laboratuvar tecrübesi, uzman ekibi ve son teknoloji araçları ile sizlere en iyi hizmeti sunmayı taahhüt eder.
